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Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細胞

簡要描述:DH10B Chemically Competent Cell/Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細胞
保存條件:-80℃

  • 產(chǎn)品型號:DH10B
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時間:2024-03-21
  • 訪  問  量:215

詳細介紹

品牌Abnbio貨號ABG018-50
規(guī)格50支100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途細胞培養(yǎng)應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

DH10B Chemically Competent Cell

基因型:

F- mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ?M15 ?lacX74 recA1endA1 araD139 ?(ara, leu)7697 galE15 galK λ- rpsL nupG

簡要說明:

DH10B菌株來源于MC1061菌株,mcrA、mcrBC及mrr突變使DH10B菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA(Therefore , genomic DNA , both prokaryotic andeukaryotic, can be cloned efficiently in DH10B)。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。φ80dlacZ?M15 marker的存在使DH10B可用于藍白斑篩選,rpsL賦予其LIAN霉素抗性。 

5TM系列DH10B感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>108cfu/μg。

操作說明:

1.DH10B感受態(tài)細胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中),加入目 的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手打EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。 

2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。 

3.向離心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB無菌培養(yǎng)基,混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。 

4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。 

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少13h。

注意事項:

1.感受態(tài)細胞最好在冰上融化。 

2.混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。 

3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。



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