當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > Abnbio感受態(tài)細胞 > 克隆感受態(tài)細胞 非電擊 > DH10BChemically Competent Cell克隆感受態(tài)細胞
簡要描述:DH10B Chemically Competent Cell/Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細胞
保存條件:-80℃
ARTICLES
詳細介紹
品牌 | Abnbio | 貨號 | ABG018-50 |
---|---|---|---|
規(guī)格 | 50支100ul | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 細胞培養(yǎng) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
DH10B Chemically Competent Cell
基因型:
F- mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ?M15 ?lacX74 recA1endA1 araD139 ?(ara, leu)7697 galE15 galK λ- rpsL nupG
簡要說明:
DH10B菌株來源于MC1061菌株,mcrA、mcrBC及mrr突變使DH10B菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA(Therefore , genomic DNA , both prokaryotic andeukaryotic, can be cloned efficiently in DH10B)。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。φ80dlacZ?M15 marker的存在使DH10B可用于藍白斑篩選,rpsL賦予其LIAN霉素抗性。
5TM系列DH10B感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>108cfu/μg。
操作說明:
1.DH10B感受態(tài)細胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中),加入目 的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手打EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB無菌培養(yǎng)基,混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少13h。
注意事項:
1.感受態(tài)細胞最好在冰上融化。
2.混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
產(chǎn)品咨詢
聯(lián)系我們
合肥恩派爾貿(mào)易有限公司 公司地址:安徽省合肥市高新區(qū)黃山路624號桑夏精英時代廣場507室 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)掃一掃 更多精彩
公眾號
小程序